Der prädiktive Wert von CD4, CD8 und C-reaktivem Protein für die Prognose schistosomaler und nicht-schistosomaler Erkrankungen

BMC Gastroenterology Band 23, Artikelnummer: 194 (2023) Diesen Artikel zitieren

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Obwohl die Bilharziose im Wesentlichen ausgerottet wurde, ist sie in China noch nicht vollständig ausgerottet und in Europa kommt es in den letzten Jahren gelegentlich zu Ausbrüchen. Der Zusammenhang zwischen einer durch Schistosoma japonicum verursachten Entzündung und Darmkrebs (CRC) ist immer noch unklar, und über entzündungsbasierte Prognosesysteme für schistosomalen Darmkrebs (SCRC) wurde selten berichtet.

Um die unterschiedlichen Rollen von tumorinfiltrierenden Lymphozyten (TILs) und C-reaktivem Protein (CRP) bei SCRC und bei nicht-schistosomalem CRC (NSCRC) zu untersuchen und ein mögliches Vorhersagesystem zur Bewertung der Ergebnisse und zur Verbesserung der Risikostratifizierung für CRC-Patienten bereitzustellen, insbesondere für Darmkrebspatienten mit Schistosomiasis.

Bei 351 CRC-Tumoren wurde die Dichte von CD4+-, CD8+-T-Zellen und CRP in intratumoralen und stromalen Kompartimenten immunhistochemisch unter Verwendung eines Gewebemikroarrays untersucht.

Es gab keinen Zusammenhang zwischen TILs und CRP und Schistosomiasis. Die multivariate Analyse identifizierte stromales CD4 (sCD4) (p = 0,038), intratumorales CD8 (iCD8) (p = 0,003) und Bilharziose (p = 0,045) als unabhängige Prognosefaktoren für das Gesamtüberleben (OS) in der gesamten Kohorte; und sCD4 (p = 0,006) und iCD8 (p = 0,020) waren unabhängige Prognosefaktoren für OS im NSCRC- bzw. SCRC-Satz. Außerdem stellten wir fest, dass es zwischen CRC-Patienten mit und ohne Schistosomiasis keine Unterschiede in den TILs und CRP gab, die in verschiedenen Bereichen des Tumorgewebes verteilt waren.

Die Ergebnisse erinnern uns daran, dass verschiedene Subtypen von TILs ein unterschiedliches biologisches Verhalten und einen unterschiedlichen Prognosewert in der Immunmikroumgebung von NSCRC- und SCRC-Patienten aufweisen. In der Zwischenzeit erfordern die Ergebnisse eine Stratifizierung von Patienten mit Schistosomiasis, was die Beratung und Behandlung der Patienten erleichtern könnte.

Peer-Review-Berichte

Schistosomiasis ist eine chronische parasitäre Erkrankung, die durch einen Blutegel der Gattung Schistosoma verursacht wird [1]. Schistosomiasis ist eine weit verbreitete endemische Krankheit, die in 74 Ländern vorkommt [1] und weltweit sind über 250 Millionen Menschen infiziert [2]. Aufgrund des Klimawandels und infizierter Reisender, die aus Endemiegebieten zurückkehren, gibt Bilharziose in Europa, insbesondere in Südeuropa, zunehmend Anlass zur Sorge [3]. Der Bezirk Qingpu in Shanghai war einst ein endemisches Gebiet der Bilharziose, und die Menschen vor Ort waren stark davon betroffen. Aus der Anamnese sind immer noch zahlreiche Bilharziose-assoziierte Darmkrebspatienten übrig geblieben. Und in unserer täglichen Arbeit konnten gelegentlich Bilharziose-assoziierte Darmkrebspatienten beobachtet werden.

Es wurde vermutet, dass Schistosomiasis in China signifikant mit einer erhöhten Darmkrebsmortalität korreliert [4]. Die Studie von Ming-Chai et al. [5] ergab eine Ähnlichkeit zwischen chronischer Schistosomiasis und Colitis ulcerosa hinsichtlich der Prädisposition für Karzinome, da Pseudopolyposis, ektopische Regenerationsdrüsen, Epithelproliferation und Ulzeration bei beiden häufig auftreten. Sie deuteten auf einen starken Zusammenhang zwischen Schistosoma japonicum und Darmkrebs hin. Zu einer ähnlichen Schlussfolgerung kamen Yu et al. [6] aus ihren Studien zu verschiedenen Arten von schistosomalen Eipolypen. Alle diese Studien legen nahe, dass Shistosomiasis ein Risikofaktor für Darmkrebs ist. Und unsere vorherige Studie legte nahe, dass Bilharziose ein unabhängiger, ungünstiger Vorhersagefaktor für Darmkrebs ist [7]. Einige weisen jedoch darauf hin, dass ein Anstieg des Darmkrebsrisikos gering sei [6, 8]. Daher mussten die Auswirkungen der durch Schistosomiasis verursachten Entzündung auf das CRC aufgeklärt werden. Über entsprechende Arbeiten wurde bisher jedoch nur selten berichtet.

Es war bekannt, dass tumorinfiltrierende Lymphozyten (TILs) eine aktive entzündliche Tumormikroumgebung widerspiegeln. Und immuntherapeutische Strategien, die die verschiedenen Komponenten des Immunsystems nutzen, um lebensfähige Tumorzellen zu eliminieren, sind eine vielversprechende Therapiestrategie. Es wurden mehrere Studien durchgeführt, um die prognostische Bedeutung von TILs bei Krebserkrankungen beim Menschen zu bewerten, und es wurde gezeigt, dass eine ausgeprägte lymphatische Infiltration ein prognostischer Parameter für ein besseres Überleben bei CRC ist [9,10,11]. In der Literatur wurde jedoch nie über entzündungsbasierte Prognosesysteme für schistosomalen Darmkrebs berichtet. TILs bestehen aus verschiedenen Lymphozyten mit unterschiedlichen Funktionen. CD4+, CD8+ sind die häufigsten Lymphozyten. Von ihnen spielen CD8+ T-Zellen eine entscheidende Rolle beim Schutz der Immunität gegen viele infektiöse Krankheitserreger und können bösartige Zellen durch die Freisetzung von Perforinen und Granzymen ausrotten, die zum Tod von Tumorzellen beitragen können [12]. CD4+-T-Zellen sezernierten immunregulatorische Zytokine wie IFN-γ und TNF, die in Tumoren zytolytische T-Zell-Reaktionen auslösen können. C-reaktives Protein (CRP), ein Akute-Phase-Reaktant, stimuliert in erster Linie das angeborene Immunsystem, indem es die Phagozytose erleichtert, moduliert aber auch die adaptive Immunität [13, 14]. Es wurde gezeigt, dass Serum-CRP einen prognostischen Wert bei CRC hat [15, 16]. Der prognostische Wert von intratumoralem CRP bleibt jedoch unklar, insbesondere bei CRC-Patienten mit Schistosomiasis.

Mit diesen Überlegungen haben wir CD4 + , CD8 + und CRP bei CRC immunhistochemisch bewertet und ihre unterschiedlichen prognostischen Rollen bei CRC-Patienten mit und ohne Schistosomiasis verglichen. Diese Ergebnisse könnten die wichtige Rolle von CD4 + , CD8 + und CRP bei schistosomalem Darmkrebs aufdecken und ein mögliches Vorhersagesystem zur Bewertung der Ergebnisse für Patienten mit Bilharziose darstellen.

In diese retrospektive Studie wurden 351 nicht ausgewählte CRC-Patienten einbezogen, die von Januar 2008 bis August 2016 eine kurative Resektion ohne präoperative Chemotherapie in der Qingpu-Zweigstelle des Zhongshan-Krankenhauses der Fudan-Universität erhalten hatten. Klinisch-pathologische Informationen der Patienten in dieser Umfrage wurden aus klinischen Aufzeichnungen und Pathologieberichten gesammelt. Die örtliche Ethikkommission der Qingpu-Zweigstelle des Zhongshan-Krankenhauses genehmigte das Protokoll dieser Studie, die in Übereinstimmung mit der Deklaration von Helsinki durchgeführt wurde. Von allen Patienten wurde eine schriftliche Einverständniserklärung eingeholt. Die Einschluss- und Ausschlusskriterien waren wie zuvor beschrieben [7].

Gewebemikroarrays (TMA) wurden wie zuvor beschrieben konstruiert [17]. Mit Hämatoxylin und Eosin (H&E) gefärbte Objektträger aus Gewebeblöcken wurden auf Eignung der repräsentativen Interessenbereiche mit einer hohen Dichte an Tumorzellen überprüft. Die entsprechenden Regionen wurden auf archivierten, formalinfixierten, in Paraffin eingebetteten (FFPE) Gewebeblöcken markiert. Die repräsentativen Bereiche (2 mm breit und 6 mm lang) des Tumors wurden extrahiert und dann entsprechend der entsprechenden Stelle einzeln vertikal in den Empfängerblock gepflanzt. Die Pflanzfläche wurde auf dem Aggregationsgerät aggregiert. Es wurde ein Array mit maximal 40 Kernen aufgebaut.

Drei bis 5 μm dicke CRC-Gewebe wurden nacheinander geschnitten, anschließend entparaffiniert und mit abgestuften Alkoholen rehydriert. Die Objektträger wurden im automatisierten Objektträgerfärbegerät Roche Ventana Benchmark XT (Ventana Medical Systems, Roche, Frankreich) gemäß den Anweisungen des Herstellers immunhistochemisch gefärbt. Monoklonale und polyklonale Anti-Human-Antikörper wurden zur Identifizierung von CD4 + T-Zellen (Anti-CD4, 4B12, Dako), CD8 + T-Zellen (Anti-CD8, Ab4055, Abcam) und CRP (Abcam, Cambridge, Massachusetts, Ab 32.412) verwendet , monoklonales Kaninchen Y284).

Die TMA-Objektträger wurden mit einem Scannersystem (PRECICE 500B) bei 40-facher Vergrößerung gescannt. Für CD4 und CD8 wurden die Dichten positiv gefärbter Zellen auf Ganzschnittobjektträgern mithilfe eines Bildanalysesystems (Image J Software, USA) bewertet (Zellen pro Quadratmillimeter) (Abb. 1A, B). Mindestens die Hälfte der Kernfläche wurde zufällig ausgewählt und die Ergebnisse der berechneten Dichten extrahiert und in eine Excel-Datei übertragen. Die Messungen wurden als mittlere Anzahl positiver Zellen pro Gewebeeinheit in Quadratmillimetern sowie als Anzahl positiver Zellen pro 1 mm2 großer Gewebeeinheit aufgezeichnet.

Immunhistochemische (IHC) Färbung der repräsentativen CD4-Expression und CD8-Expressionspositivität in verschiedenen Tumorbereichen. Eine CD4-Expressionspositivität (× 100) im intratumoralen Bereich (iCD4) (innerhalb des Kreises) und im Stromabereich (sCD4) (außerhalb des Kreises). B CD8-Expressionspositivität (× 200) im intratumoralen Bereich (iCD8) (innerhalb des Kreises) und im Stromabereich (sCD8) (außerhalb des Kreises)

Die Färbung des C-reaktiven Proteins (CRP) befand sich diffus im Zytoplasma der Stromazellen und Tumorzellen (Abb. 2A-C).

Immunhistochemisches (IHC) Färbemuster für C-reaktives Protein (CRP). AA-negatives immunhistochemisches Färbemuster (× 100); B Positives IHC-Färbemuster für Tumor-CRP (× 200). C Positives IHC-Färbemuster für stromales CRP (× 100)

Schistosomen-Eizellen wurden in allen ursprünglich HE-gefärbten, formalinfixierten, in Paraffin eingebetteten (FFPE) Schnitten (normalerweise 4–6 Objektträger) beobachtet, die von zwei verblindeten Pathologen bei 10-facher und 40-facher Vergrößerung unter einem herkömmlichen Lichtmikroskop untersucht wurden zu den klinischen Daten. Die Diagnose einer Schistosomiasis wurde durch den Nachweis von Schistosomeneiern in HE-gefärbten Objektträgern gestellt (siehe Abb. 1).

Tumorknospung wurde als das Vorhandensein dedifferenzierter Einzelzellen oder kleiner Cluster von bis zu 5 Zellen an der invasiven Front des CRC definiert [18]. Die Beurteilung der Tumorknospung erfolgte wie zuvor beschrieben [7]. Kurz gesagt wurde die 10-HPF-Methode verwendet [19]. Die invasive Front wird zunächst mit geringer Vergrößerung (4 × bis 10 ×) gescannt, um Bereiche mit der höchsten Knospungsdichte zu identifizieren. Anschließend werden die Tumorknospen unter starker Vergrößerung (40-fach) gezählt und die Anzahl der Tumorknospen wird angegeben. Die Beurteilung der Tumorknospung wurde von zwei Pathologen durchgeführt, die keine Kenntnis von den klinischen Daten hatten. Als Durchbruchspunkt wurden fünf Tumorknospungszählungen verwendet. Kurz gesagt wurden Tumorknospenzahlen größer oder gleich 5 als hohe Gruppe definiert, andernfalls als niedrige Gruppe.

Die Zusammenhänge zwischen CD4 und CD8 und klinisch-pathologischen Merkmalen wurden mithilfe des Chi-Quadrat-Tests (χ2) analysiert. Die Zeit-bis-Ereignis-Ergebnisse wurden vom Datum der anfänglichen kurativen Resektion bis zum Datum der letzten Nachuntersuchung definiert. Die univariate Analyse basierte auf dem Cox-Proportional-Hazards-Regressionsmodell. Ein multivariates schrittweises Cox-Vorwärtsregressionsmodell wurde verwendet, um unabhängige Prädiktoren für das Überleben zu ermitteln. Die Überlebenskurven wurden mithilfe der Kaplan-Meier-Methode und des Log-Rank-Tests verglichen. Alle Tests waren zweiseitig und ein P-Wert von weniger als 0,05 wurde als statistische Signifikanz angesehen. Die Daten wurden mit der Software SPSS Version 22.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA) analysiert.

Die mittlere Nachbeobachtungszeit betrug 62,4 (1,25–134,4) Monate. Während der Nachuntersuchung starben 41,6 % (146 von 351) Patienten. Die mittlere und mittlere Zeit bis zum OS betrug 62,54 bzw. 62,85. Die klinisch-pathologischen Merkmale von insgesamt 351 Fällen von Darmkrebs sind in Tabelle 1 zusammengefasst. Kurz gesagt, das Alter der Patienten mit Bilharziose war überwiegend älter als das der Patienten ohne Bilharziose (p < 0,001). Unerwarteterweise gab es keinen signifikanten Unterschied in der Morphologie zwischen Darmkrebs im Zusammenhang mit Bilharziose und Darmkrebs ohne Bilharziose (Tabelle 1). In der gesamten Kohorte lag das Durchschnittsalter bei 69 Jahren (Bereich 33–91), wobei die Häufigkeit zwischen Frauen 39 % (137 von 351) und Männern 61 % (214 von 351) betrug. Bei 27 % der Patienten befand sich der Tumor im Rektum, bei 33 % im linken Dickdarm und bei 40 % im rechten Dickdarm. Auf der Grundlage des AJCC Staging Manual (siebte Auflage) wurden 76 % der Fälle histologisch als „gut“ bis „mäßig differenziert“ und 24 % als „schlecht differenziert“ eingestuft. Der vorherrschende histologische Typ war das Adenokarzinom (311 von 351), Schleim- und Siegelringzellkarzinome machten 11 % (40 von 351) aus. Bei 122 (35 %) bzw. 31 (1 %) Tumoren wurde eine Gefäß- und Nervenbeteiligung festgestellt. Bei 144 (41 %) Patienten wurde eine Lymphknotenmetastasierung festgestellt. Fälle im Stadium I–II machten 54 % (190 von 351) aus, während Fälle im Stadium III–IV jeweils 46 % (161 von 351) ausmachten. Schistosoma-Eier konnten in fast 39 % der Fälle unter dem Mikroskop beobachtet werden.

CD4+- und CD8+-Zellen wurden sowohl im Krebsstroma als auch im Krebsepithel (d. h. intraepithelial) beobachtet. Repräsentative Bilder der Lymphozyteninfiltration sind in Abb. 1A, B dargestellt. Die Verteilungen der CD4+- und CD8+-Zelldichte in verschiedenen Bereichen sind in Tabelle 2 und Abb. 3 dargestellt. Die optimalen Cutoff-Werte von CD4+-T- und CD8+-T-Zellen Die Dichte wurde mit dem X-Tile-Programm bestimmt und betrug 29 Zellen/mm2 für intraepitheliales CD4 (iCD4) (Tabelle 2 und sup. Abb. 2A-C) und 145 Zellen/mm2 für Stroma-CD4 (sCD4) (Tabelle 2 und sup. Abb. 3A-C) und 77 Zellen/mm2 für intraepitheliales CD8 (iCD8) (Tabelle 2 und sup. Abb. 4A-C) und 645 Zellen/mm2 für Stroma-CD8 (sCD8) (Tabelle 2 und sup. Abb. 5A-C). Die Patienten wurden zur weiteren Analyse auf der Grundlage ihrer jeweiligen Grenzwerte in zwei Gruppen eingeteilt. Die positive Färbung des C-reaktiven Proteins (CRP) befand sich diffus im Zytoplasma der Stromazellen und Tumorzellen (Abb. 2A-C). Die CRP-positive Färbung wurde als positiv definiert, wohingegen die negative Färbung als negativ definiert wurde.

Heterogenität tumorinfiltrierender Immunzellen. Die Dichte der iCD4+-, sCD4+-, iCD8+- und sCD8+-Zellen unterschied sich deutlich je nach Tumorlokalisation (Ergebnisse wurden mit dem ungepaarten t-Test untersucht); Abkürzungen: iCD4 = intratumorales CD4; sCD4 = stromales CD4; iCD8 = intratumorales CD8; sCD8 = stromales CD8

Die Beziehung zwischen der TIL-Dichte und der Patientendemografie ist in Tabelle 3 aufgeführt. Es wurden keine signifikanten Korrelationen zwischen der iCD4 + T-Zelldichte und klinischen Merkmalen wie Alter, Geschlecht, TNM-Stadium, Tumordifferenzierung usw. beobachtet (p > 0,05). Es gab auch keine Korrelation zwischen der sCD4 + T-Zelldichte und anderen klinischen Merkmalen mit Ausnahme der Tumorknospung (p = 0,031), der Lymphknotenmetastasierung (p = 0,045) und dem TNM-Stadium (p = 0,001). Darüber hinaus gab es einen signifikanten Zusammenhang zwischen der iCD8 + T-Zelldichte und dem Alter (p < 0,001) sowie der Tumorablagerung (p = 0,032). Darüber hinaus gab es einen signifikanten Zusammenhang zwischen der sCD8 + T-Zelldichte und der Tumorablagerung (p = 0,004). Es gab jedoch keinen signifikanten Zusammenhang zwischen TILs und Shistosomiasis (p > 0,05).

Der Zusammenhang zwischen sCRP und tCRP und den klinischen Merkmalen ist in der Ergänzungstabelle 1 aufgeführt. Die Ergebnisse zeigten, dass sCRP umgekehrt mit der Tumorgröße (p = 0,020) und der Dickdarmperforation (p = 0,001) assoziiert war. Darüber hinaus war tCRP auch negativ mit einer Dickdarmperforation assoziiert (p = 0,001). Unerwarteterweise gab es keinen Zusammenhang zwischen tCRP oder sCRP und Schistosomiasis sowie CD4 + T-Zellen und CD8 + T-Zellen.

In der gesamten Kohorte identifizierte die univariate Cox-Regressionsanalyse klinische Faktoren, die signifikant mit dem OS assoziiert waren (Tabelle 4): iCD4 (p = 0,015), sCD4 (p = 0,002), iCD8 (p < 0,001), Alter (p = 0,010) und Geschlecht (p = 0,008), pathologisches T-Stadium (p < 0,001), Lymphknotenmetastasierung (p < 0,001), TNM-Stadium (p < 0,001), Tumordifferenzierung (p < 0,001), lymphovaskuläre Invasion (p < 0,001), Tumorablagerung (p < 0,001), Tumorknospung (p < 0,001) und Schistosomiasis (p = 0,044), wohingegen nur Geschlecht (p = 0,009), Pathologie T-Stadium (p = 0,035), TNM-Stadium (p < 0,001), sCD4 (p = 0,038), iCD8 (p = 0,003), Schistosomiasis (p = 0,045) und Tumorablagerungen (p < 0,001) wurden in der multivariaten Regressionsanalyse als unabhängige Risikofaktoren für OS identifiziert (Tabelle 4).

Im NSCRC-Satz identifizierte die univariate Cox-Regressionsanalyse klinische Faktoren, die signifikant mit dem OS assoziiert sind (Tabelle 4): sCD4 (p < 0,001), iCD8 (p = 0,002), Geschlecht (p = 0,017), pathologisches T-Stadium (p = 0,001). , Lymphknotenmetastasierung (p < 0,001), TNM-Stadium (p < 0,001), Tumordifferenzierung (p = 0,003), lymphovaskuläre Invasion (p < 0,001), Tumorablagerung (p < 0,001) und Tumorknospung (p < 0,001). Variablen, die einen signifikanten Einfluss auf das OS zeigten, wurden in die multivariate Analyse einbezogen. Geschlecht (p = 0,023), pathologisches T-Stadium (p = 0,046), sCD4 (p = 0,006), Tumorknospung (p = 0,034) und Tumorablagerung (p < 0,0001) wurden als unabhängige prognostische Faktoren identifiziert, die mit dem OS assoziiert sind die Menge in der multivariaten Regressionsanalyse (Tabelle 4).

Im SCRC-Satz identifizierte die univariate Cox-Regressionsanalyse klinische Faktoren, die statistisch signifikant mit dem OS assoziiert waren (Tabelle 4): iCD8 (p = 0,001), sCD8 (p = 0,040), Lymphknotenmetastasen (p < 0,001) und TNM-Stadium (p < 0,001). ) und Tumorablagerung (p < 0,001), wohingegen nur Lymphknotenmetastasierung (p < 0,001), iCD8 (p = 0,020) und Tumorablagerung (p < 0,001) als unabhängige prognostische Faktoren identifiziert wurden, die in diesem Satz im multivariaten Vergleich mit dem OS assoziiert waren Regressionsanalyse (Tabelle 4). Unerwarteterweise gab es in der gesamten Kohorte und den Untergruppen keinen Zusammenhang zwischen stromalem CRP und tumoralem CRP und OS.

Eine Kaplan-Meier-Analyse, die auf dem Cutoff-Wert der Dichte von CD4 + T-Zellen und CD8 + T-Zellen in verschiedenen Tumorbereichen basierte, wurde durchgeführt, um die Variablen des OS in verschiedenen Gruppen zu bewerten. In der gesamten Kohorte hatten Patienten in der sCD4- und iCD8-Gruppe mit hoher Dichte im Vergleich zur Gruppe mit niedriger Dichte ein signifikant höheres OS (p = 0,0020, p < 0,001; Abb. 4A und B). Im NSCRC-Satz erzielten Patienten in der sCD4-Gruppe mit hoher Dichte im Vergleich zu Patienten in der Gruppe mit niedriger Dichte ein vorteilhaftes OS (p = 0,0004, Abb. 4C). Darüber hinaus hatten Patienten in der iCD8-Gruppe mit hoher Dichte im Vergleich zu denen in der Gruppe mit niedriger Dichte auch ein günstigeres Überleben (p = 0,0008, Abb. 4D). In keiner Untergruppe gab es einen Zusammenhang zwischen sCRP oder tCRP und OS (Daten wurden nicht angezeigt).

Kaplan-Meier-Kurven (KM) für das Gesamtüberleben (OS) von Patienten mit Darmkrebs (CRC) mit niedriger oder hoher TIL-Dichte. A.OS-Analyse der stromalen CD4 + T-Zelldichte in der gesamten Kohorte; B. OS-Analyse der intratumoralen CD8 + T-Zelldichte in der gesamten Kohorte; C. OS-Analyse der stromalen CD4 + T-Zelldichte bei Patienten mit schistosomalem CRC (NSCRC); D. OS-Analyse der intratumoralen CD8 + T-Zelldichte bei Patienten mit nicht-schistosomalem CRC (SCRC).

Als nächstes verglichen wir die Dichteverteilung von CD4+- und CD8+-T-Zellen bei CRC-Patienten mit und ohne Schistosomiasis (Daten wurden nicht gezeigt). Die Verteilung der CD4 + T-Zellen im Stroma- oder Tumorbereich zwischen NSCRC- und SCRC-Gruppen wies keine signifikanten Unterschiede auf. Auch die Verteilung der CD8+-T-Zellen im Stroma- oder Tumorbereich wies zwischen der NSCRC- und der SCRC-Gruppe keine signifikanten Unterschiede auf. Die Expressionspositivitätsrate von stromalem CRP betrug 22 % bzw. 30 % in der NSCRC-Gruppe und der SCRC-Gruppe. Darüber hinaus betrug die Expressionspositivitätsrate von Tumor-CRP 14 % bzw. 15 % in der NSCRC-Gruppe und der SCRC-Gruppe.

Bilharziose führt bei CRC-Patienten zu entzündlichen Veränderungen und ist gut untersucht. Es fehlen jedoch immer noch direkte Beweise für entzündliche Veränderungen, die durch eine Entzündungsreaktion nach einer Bilharziose-Infektion verursacht werden. Darüber hinaus waren entzündungsbasierte Prognosesysteme für Darmkrebs ausgeprägt, entsprechende Prädiktoren für schistosomalen Darmkrebs wurden jedoch bisher noch nie beschrieben. In der vorliegenden Studie fanden wir heraus, dass in verschiedenen Tumorbereichen verteilte CD4+- und CD8+-T-Zellen mit weniger aggressiven Tumormerkmalen korrelierten, in verschiedenen Tumorbereichen verteiltes CRP jedoch mit aggressiveren Tumormerkmalen verbunden war. Darüber hinaus deuten die Ergebnisse darauf hin, dass iCD4, sCD8, Schistosomiasis, Geschlecht, pathologisches T-Stadium, TNM-Stadium und Tumorablagerung unabhängige Prognosefaktoren für das OS in der gesamten Kohorte waren; Im NSCRC-Set waren sCD4, Tumorknospung, Geschlecht, pathologisches T-Stadium und Tumorablagerung unabhängige Prognosefaktoren für das OS; Im SCRC-Set waren iCD8, Lymphknotenmetastasen und Tumorablagerungen unabhängige Prognosefaktoren für das OS. Darüber hinaus stellten wir fest, dass es zwischen CRC-Patienten mit und ohne Schistosomiasis keine Unterschiede in der TIL-Dichte und der Positivität der CRP-Expression gab, die in verschiedenen Bereichen des Tumorgewebes verteilt waren.

Unsere Ergebnisse zeigten, dass iCD4 und sCD8 mit einem günstigen OS für CRC-Patienten verbunden waren. Wenn die Patienten jedoch basierend auf dem Status der schistosomalen Infektion in NSCRC- und SCRC-Gruppen eingeteilt wurden, waren sCD4 und iCD8 unabhängige Prognosefaktoren für NSCRC-Patienten bzw. für SCRC-Patienten. Diese Ergebnisse erinnern uns daran, dass TILs, die in verschiedenen Tumorbereichen verteilt sind, ein unterschiedliches biologisches Verhalten und eine unterschiedliche Funktion aufweisen und dass die Immunmikroumgebung bei NSCRC- und SCRC-Patienten unterschiedlich ist. In der Zwischenzeit erfordern die Ergebnisse eine Stratifizierung von Patienten mit Schistosomiasis und könnten die Beratung und Behandlung der Patienten erleichtern. Die Ergebnisse ebnen auch den Weg für eine individuelle Chemotherapie bei CRC-Patienten mit Bilharziose und ohne Bilharziose, die individuell auf der Infiltration von TILs basiert, da CRC-Patienten mit hohen TIL-Werten mit einer Chemotherapie auf 5-Fluorouracil-Basis bessere Ergebnisse erzielen könnten.

CD8+-T-Zellen sind zytotoxische T-Lymphozyten, die Krebszellen direkt angreifen und eine zentrale Rolle bei der Krebsimmunität spielen [20]. Frühere Studien ergaben erhebliche Hinweise darauf, dass die Dichte von CD8 + TILs mit einem günstigen Überleben bei Patienten mit verschiedenen Krebsarten verbunden ist [20,21,22]. In Übereinstimmung mit früheren Berichten bestätigte diese Studie die Nützlichkeit der CD8+-T-Zelldichte als prognostische Faktoren (Tabelle 4 und Abb. 4). Es wurde berichtet, dass die CD4 + T-Zelldichte ein ungünstiger Prognosefaktor bei anderen Krebsarten ist, z. B. Lungen-, Nieren-, Prostata- und Brustkrebs [23,24,25,26]. Im Gegenteil, die Studie von Taichi Kuwahara et al. zeigte, dass CD4 + T-Zelldichten mit günstigen klinischen Ergebnissen verbunden waren [27]. Dies steht im Einklang mit unseren Ergebnissen. Der Grund für diese Diskrepanz bleibt unklar, könnte aber daran liegen, dass die Funktion von CD4 + T-Zellen innerhalb der Tumormikroumgebung – also bei der Aktivierung oder Unterdrückung der Immunantwort – je nach Krebsart unterschiedlich sein kann. Außerdem stellten wir fest, dass CRP nicht mit dem klinischen Ergebnis assoziiert war. Dies kann daran liegen, dass CRP ein guter Prädiktor für klinische Ergebnisse in der akuten Phase ist [15, 28, 29], oder dass Serum-CRP besser als prognostischer Prädiktor geeignet ist. Es war bekannt, dass im Darm abgelagerte Schistosoma-Eier eine Immunreaktion hervorrufen und zu chronischen Entzündungen und dann zu Shisotomiasis führen. Es wurde spekuliert, dass die TIL-Dichten bei NSCRC- und SCRC-Patienten unterschiedlich seien. Unsere Ergebnisse zeigten jedoch, dass die TIL-Dichten und die CRP-Expressionsniveaus in den beiden Sätzen ähnlich waren. Dies kann daran liegen, dass sich die Patienten zum Zeitpunkt der Diagnose nicht im akuten, sondern im chronischen Stadium befanden. Darüber hinaus kann dies dadurch erklärt werden, dass Patienten mit Bilharziose offensichtlich älter sind als Patienten ohne Bilharziose (Tabelle 1) und die Immunantwort älterer Menschen schwächer ist als die junger.

Unsere retrospektive Studie hatte mehrere Einschränkungen. Erstens haben wir die Grenzen der Verwendung eines TMA-Ansatzes zur Beurteilung der Expression eines Biomarkers erkannt, der möglicherweise nur lokal in Proben vorhanden ist, was die Möglichkeit falsch negativer Ergebnisse erhöht, was möglicherweise die Bedeutung von TILs bei CRC verändern könnte. Zweitens ist die Einheitlichkeit der Ergebnisse möglicherweise gering, da alle Ergebnisse an einer einzigen Institution generiert wurden. Weitere Arbeiten sind erforderlich, um die vorliegenden Ergebnisse in einer größeren Kohorte von Multizentren zu validieren. Darüber hinaus können Validierungsstudien an ganzen Gewebeschnitten durchgeführt werden, um die Auswahl der Regionen zu optimieren, die für die TIL-Bewertung am besten geeignet sind. Drittens wurde die Diagnose einer Schistosomiasis durch den Nachweis von Schistosomeneiern in HE-gefärbten Objektträgern gestellt. Dies wird dazu führen, dass positive Fälle fehlen und eine Datenverzerrung entsteht. Wir haben versucht, andere Methoden zu verwenden, um Bilharziose-bezogene Indikatoren zu erkennen, wie zum Beispiel Bilddaten und serologische Tests. Allerdings waren die Bildgebungsdaten noch nicht vollständig und es konnte kein Serum gesammelt werden, da die in dieser Studie verwendete Probe Jahre zurückliegt. Derzeit werden umfassendere Materialien zum Thema Schistosomiasis gesammelt, die zur Validierung der Ergebnisse dieser Studie verwendet werden sollen.

In der vorliegenden Studie waren die iCD4+- und sCD4+-T-Zelldichten unabhängige vorteilhafte Prognosefaktoren für NSCRC-Patienten bzw. SCRC-Patienten. Wir glauben, dass diese Studie die erste ist, die über die prognostische Bedeutung von TILs und CRP bei Bilharziose-assoziierten CRC-Patienten berichtet. Daher erinnern uns die Ergebnisse dieser Studie daran, dass verschiedene Subtypen von TILs, die in verschiedenen Tumorbereichen verteilt sind, ein unterschiedliches biologisches Verhalten und einen unterschiedlichen Prognosewert in der Immunmikroumgebung von NSCRC- und SCRC-Patienten aufweisen. In der Zwischenzeit erfordern die Ergebnisse eine Stratifizierung von Patienten mit Schistosomiasis und könnten die Beratung und Behandlung der Patienten erleichtern.

Die während der aktuellen Studie verwendeten und/oder analysierten Datensätze sind auf begründete Anfrage bei den entsprechenden Autoren erhältlich.

Darmkrebs

Schistosomaler Darmkrebs

Nicht-schistosomaler Darmkrebs

Tumorinfiltrierende Lymphozyten

C-reaktives Protein

Gewebe-Microarray

Intratumorales CD4

Stroma CD4

Intratumorales CD8

Stroma CD8

Gesamtüberleben

Hämatoxylin und Eosin

Formalinfixiert, in Paraffin eingebettet

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Keiner

Diese Arbeit wird von der China Shanghai Municipal Commission of Health and Family Planning unterstützt (Zuschuss-Nr. w2021-25 und QWJ2022-04 und QKY-2022–12).

Qingpu-Zweigstelle des Zhongshan-Krankenhauses der Fudan-Universität, No. 1158 East Park Road, Qingpu District, Shanghai, 200032, VR China

Meihong Cheng, Hongyan Jing, Dacheng Bu, Jing Liu, Kui Lu, Jican Liu, Yanchao Xu, Ting Zhu, Junxia Yao, Qilin Zhai und Weixia Wang

Abteilung für Pathologie, Zhongshan-Krankenhaus, Fudan-Universität, Shanghai, 201700, VR China

Yingyong Hou

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Wang WW und Zhai QL: Projektentwicklung, Datenanalyse, Manuskripterstellung/-bearbeitung; Cheng MM und Yao JX: bewerteten alle Färbescheiben; Jing HY, Bu DC, Liu J, Lu K, Liu JC, Xu YC, Zhu T, Hou YY und Yao JX: Datenanalyse und -sammlung, Manuskriptbearbeitung. Die Autoren haben das endgültige Manuskript gelesen und genehmigt.

Korrespondenz mit Qilin Zhai oder Weixia Wang.

Diese Studie wurde von der medizinischen Ethikkommission der Fudan-Universität gemäß der Helsinki-Erklärung von 1975 genehmigt. Von allen Patienten wurde zuvor eine schriftliche Einverständniserklärung eingeholt.

Von jedem Teilnehmer wurde eine schriftliche Einverständniserklärung eingeholt.

Die Autoren erklären, dass sie keine konkurrierenden Interessen haben.

Springer Nature bleibt neutral hinsichtlich der Zuständigkeitsansprüche in veröffentlichten Karten und institutionellen Zugehörigkeiten.

Der Zusammenhang zwischen klinisch-pathologischen Merkmalen und tumoralem und stromalem C-reaktivem Protein. Sup Abb. 1. Typische Probe von Bilharziose-assoziiertem Darmkrebs; die roten Pfeile zeigen Schistosomen-Eizellen an. Sup Abb. 2. Bestimmung der Grenzwerte der intratumoralen CD4-Dichte von TMAs und Überlebensanalysen. Sup Abb. 3. Bestimmung der Grenzwerte der stromalen CD4-Dichte von TMAs und Überlebensanalysen. Sup Abb. 4. Bestimmung der Grenzwerte der intratumoralen CD8-Dichte von TMAs und Überlebensanalysen. Sup Abb. 5. Bestimmung der Grenzwerte der stromalen CD8-Dichte von TMAs und Überlebensanalysen.

Open Access Dieser Artikel ist unter einer Creative Commons Attribution 4.0 International License lizenziert, die die Nutzung, Weitergabe, Anpassung, Verbreitung und Reproduktion in jedem Medium oder Format erlaubt, sofern Sie den/die Originalautor(en) und die Quelle angemessen angeben. Geben Sie einen Link zur Creative Commons-Lizenz an und geben Sie an, ob Änderungen vorgenommen wurden. Die Bilder oder anderes Material Dritter in diesem Artikel sind in der Creative Commons-Lizenz des Artikels enthalten, sofern in der Quellenangabe für das Material nichts anderes angegeben ist. Wenn Material nicht in der Creative-Commons-Lizenz des Artikels enthalten ist und Ihre beabsichtigte Nutzung nicht gesetzlich zulässig ist oder über die zulässige Nutzung hinausgeht, müssen Sie die Genehmigung direkt vom Urheberrechtsinhaber einholen. Um eine Kopie dieser Lizenz anzuzeigen, besuchen Sie http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/. Der Creative Commons Public Domain Dedication-Verzicht (http://creativecommons.org/publicdomain/zero/1.0/) gilt für die in diesem Artikel zur Verfügung gestellten Daten, sofern in einer Quellenangabe für die Daten nichts anderes angegeben ist.

Nachdrucke und Genehmigungen

Cheng, M., Jing, H., Bu, D. et al. Der prädiktive Wert von CD4, CD8 und C-reaktivem Protein für die Prognose von schistosomalem und nicht-schistosomalem Darmkrebs. BMC Gastroenterol 23, 194 (2023). https://doi.org/10.1186/s12876-023-02834-z

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Eingegangen: 13. August 2022

Angenommen: 24. Mai 2023

Veröffentlicht: 05. Juni 2023

DOI: https://doi.org/10.1186/s12876-023-02834-z

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